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酶標(biāo)板實(shí)驗(yàn)優(yōu)化:加樣、洗滌、讀板全流程技巧
更新時(shí)間:2025-06-24瀏覽:184次

  酶標(biāo)板實(shí)驗(yàn)優(yōu)化:加樣、洗滌、讀板全流程技巧


  以下是天津本生對(duì)酶標(biāo)板實(shí)驗(yàn)全流程優(yōu)化的關(guān)鍵技巧,涵蓋加樣、洗滌和讀板三大核心環(huán)節(jié):

  一、加樣優(yōu)化技巧

  精準(zhǔn)加樣控制?

  使用多道移液器(誤差<2%),單次加樣時(shí)間控制在10分鐘內(nèi),避免預(yù)孵育時(shí)間差異影響重復(fù)性

  高濃度樣本需預(yù)稀釋(如1:20 PBS稀釋),溶血樣本應(yīng)棄用

  防蒸發(fā)處理?

  孵育時(shí)反應(yīng)板需加蓋密封膜,并置于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)保持濕度

  液體樣本4℃保存≤1周,-80℃長(zhǎng)期保存需密封防凍干

板.jpg

  二、洗滌關(guān)鍵參數(shù)

  操作要點(diǎn) 優(yōu)化方案 注意事項(xiàng)

  洗滌液配制 Tween-20濃度0.05%-0.1%,含0.5M NaCl 避免使用含疊氮鈉的緩沖液(HRP系統(tǒng))

  洗滌次數(shù) 常規(guī)3-5次,高背景樣本增至8次 競(jìng)爭(zhēng)法需控制單次洗滌≤2分鐘

  拍干方式 倒置拍板力度均勻,使用無(wú)屑濾紙 垂直猛拍易導(dǎo)致包被物脫落

  三、讀板質(zhì)量控制

  顯色控制?

  底物加入后每10分鐘觀察顯色,強(qiáng)陽(yáng)性孔需提前終止

  雙波長(zhǎng)檢測(cè)(主450nm/參比630nm)可減少孔間干擾

  儀器校準(zhǔn)?

  讀板前預(yù)熱酶標(biāo)儀,設(shè)置溫控參數(shù)(如37℃±0.5℃)

  邊緣孔數(shù)據(jù)棄用,僅分析中間60孔保證一致性

  四、特殊樣本處理

  高脂血樣本?:12000rpm離心10分鐘去除脂蛋白

  組織勻漿?:添加RIPA裂解液后-80℃保存,避免反復(fù)凍融

  流程銜接提示?:

  洗滌后需立即進(jìn)行下一步操作,酶標(biāo)板干燥會(huì)導(dǎo)致復(fù)合物失活

  自動(dòng)化洗板機(jī)需定期校準(zhǔn)吸液高度(距孔底0.5-1mm)

  注:以上資料僅供參考,如需完整說(shuō)明,建議聯(lián)系供應(yīng)商獲取隨貨文件。

  天津本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng),較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作,共創(chuàng)美好的未來(lái)。

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