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小麥醇溶蛋白ELISA試劑盒是用于檢測植物組織、細胞上清及相關液體樣本中小麥醇溶蛋白含量的重要工具。使用前,需將試劑盒從冷藏環境中取出,室溫平衡15-30分鐘。實驗時,采用雙抗體夾心法,將純化的小麥醇溶蛋白抗體包被微孔板,加入樣本及HRP標記的檢測抗體,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物。經過洗滌后,加底物TMB顯色,顏色深淺與樣品中小麥醇溶蛋白含量正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度,通過標準曲線計算樣品中小麥醇溶蛋白濃度。注意,實驗過程需避免交叉污染,嚴格按照說明書操作,且不同批號組分不得混用。試劑盒保存于2-8℃,有效期6個月。
BS-5040 小麥醇溶蛋白(Gliadin)ELISA試劑盒 天津本生
以下是小麥醇溶蛋白(Gliadin)ELISA試劑盒的實驗使用說明書:
一、實驗原理
采用雙抗體夾心法:用純化的Gliadin抗體包被微孔板,依次加入樣本/標準品、HRP標記的檢測抗體,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物。TMB顯色后在450nm波長下測定OD值,顏色深淺與Gliadin濃度呈正相關?。
二、試劑盒組成
組分 96孔配置 48孔配置
酶標板 12孔×8條 12孔×4條
標準品(16μg/mL) 0.5mL×1瓶 0.5mL×1瓶
酶標試劑 6mL 3mL
顯色劑A/B 各6mL 各3mL
終止液 6mL 3mL
30×洗滌液 20mL 15mL ?
三、樣本處理要求
血清/血漿?:采集后1000×g離心10-30分鐘,避免溶血?
細胞上清?:1000×g離心10分鐘去除顆粒?
組織勻漿?:用生理鹽水勻漿后離心取上清?
保存?:-20℃短期保存,-70℃長期保存,避免反復凍融?
四、操作步驟
標準品稀釋?:用標準品稀釋液進行梯度稀釋(建議濃度:0、0.2、1、4、9μg/mL)?
加樣?:
空白孔:不加樣
標準孔:50μL標準品
樣本孔:40μL稀釋液+10μL樣本(5倍稀釋)?
溫育?:37℃孵育30分鐘?
洗滌?:用稀釋后的洗滌液洗板5次,每次靜置30秒?
顯色?:每孔加顯色劑A/B各50μL,37℃避光反應10分鐘?
終止?:每孔加50μL終止液?
檢測?:450nm波長讀取OD值,繪制標準曲線計算濃度?
五、注意事項
安全防護?:避免接觸終止液/顯色劑,操作時穿戴防護裝備?
試劑保存?:
未開封試劑盒2-8℃保存
開封后酶標板需密封防潮?
質量控制?:
標準品復孔CV應<15%
樣本OD值應在標準曲線范圍內?
六、技術參數
檢測范圍?:0.2-9μg/mL(96T)?
靈敏度?:<0.1μg/mL?
有效期?:6個月(2-8℃保存)?
(注:不同品牌試劑盒可能存在細微差異,請以實際產品說明書為準)
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