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以下是關于小鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA試劑盒的實驗使用說明綜合整理:
BS-2220 小鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA試劑盒
一、實驗原理
采用雙抗體夾心法ELISA技術。將抗Aβ1-42抗體預包被于微孔板,加入樣本和標準品后,與HRP標記的檢測抗體形成復合物,經TMB顯色后通過酶標儀測定OD值,顏色深淺與Aβ1-42濃度呈正相關?12。
二、試劑盒組成
?主要組分?:
預包被微孔板(96T/48T)
標準品(濃度通常為160-400pg/mL)?24HRP標記檢測抗體?3TMB顯色液及終止液?15濃縮洗滌液(需稀釋使用)?38?保存條件?:
未開封試劑盒:2-8℃保存,有效期6個月?14開封后:建議分裝凍存于-20℃(避免反復凍融)?46三、樣本處理
?血清/血漿?:
采集后需離心(1000×g,10-30分鐘),分離上清?14避免溶血或脂血樣本?45?組織勻漿/細胞上清?:
離心去除沉淀后取上清檢測?46四、操作步驟
?標準品稀釋?:按說明書梯度稀釋(通常為2-90pg/mL范圍)?25?加樣與孵育?:
每孔加入樣本或標準品100μL,37℃孵育1-2小時?13?洗滌?:使用稀釋后的洗滌液洗板3-5次?38?顯色與終止?:
加入TMB顯色10-15分鐘,終止液終止反應?15?檢測?:
450nm波長讀取OD值,繪制標準曲線計算濃度?25五、注意事項
?質量控制?:
板內/板間變異系數應<10%?5回收率建議在84-101%范圍內?5?操作規范?:
避免使用金屬頭移液器接觸底物?3不同批號試劑不可混用?36六、結果判讀
典型標準曲線范圍:15.62-1000pg/mL,檢測限通常<31.25pg/mL?57。建議每次實驗獨立建立標準曲線?5。
如需具體品牌試劑盒的完整說明書,可提供供應商名稱進一步查詢。