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植物花色苷合成酶(ANS)ELISA試劑盒實驗使用說明書
發布時間:2025/4/17瀏覽:287次
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  以下是植物花色苷合成酶(ANS)ELISA試劑盒的實驗使用說明綜合整理:

  BS-4985  植物花色苷合成酶(ANS)ELISA試劑盒

  一、實驗原理

  采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被植物花色苷合成酶(ANS)抗體的酶標板孔中,依次加入標本、標準品和HRP標記的檢測抗體,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物。TMB底物顯色后,在450nm波長下測定吸光度(OD值),顏色深淺與樣品中ANS濃度呈正相關?。

  二、試劑盒組成

  • 微孔酶標板:12孔×8條(96T)或12孔×4條(48T)

  • 標準品:0.3mL×6管

  • 檢測抗體-HRP:10mL(96T)/5mL(48T)

  • 底物A/B:各6mL(96T)/3mL(48T)

  • 終止液:6mL(96T)/3mL(48T)

  • 20×洗滌緩沖液:25mL(96T)/15mL(48T)?

  三、樣本處理

  液體樣本:

  血清:室溫凝固10-20分鐘后,2000-3000轉/分離心20分鐘取上清

  血漿:用EDTA或肝素抗凝后離心

  組織樣本:按1:5-10比例(mg:μL)加入提取液勻漿,8000g離心10分鐘取上清?

  四、操作步驟

  試劑準備:

  提前20分鐘取出試劑盒平衡至室溫

  20×洗滌液按1:19用蒸餾水稀釋?

  加樣:

  標準孔:加50μL系列濃度標準品

  樣本孔:先加40μL稀釋液,再加10μL樣本(最終稀釋5倍)?

  孵育:37℃溫育60分鐘

  洗滌:棄液體,每孔加滿洗滌液靜置30秒后棄去,重復5次

  顯色:每孔加底物A/B各50μL,37℃避光顯色15分鐘

  終止:每孔加50μL終止液?

  五、結果計算

  • 以標準品濃度為橫坐標,OD值為縱坐標繪制標準曲線

  • 根據樣本OD值在標準曲線上推算濃度?

  六、注意事項

  保存條件:未開封試劑盒2-8℃保存,有效期6個月

  濃縮洗滌液出現結晶屬正?,F象,需溶解后使用

  OD值>1時應加大稀釋倍數,<0.1時縮小稀釋倍數?

  不同批次試劑盒組分不可混用?

  (注:具體操作請以實際購買的試劑盒說明書為準)

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