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大鼠白介素3(IL-3)ELISA試劑盒實驗使用說明書
BS-2969 大鼠白介素3(IL-3)ELISA試劑盒
以下是天津本生關于大鼠白介素3(IL-3)ELISA試劑盒的實驗使用說明綜合指南：
一、實驗原理
采用雙抗體夾心ELISA法，通過預包被抗體捕獲樣本中的IL-3，再與生物素標記的檢測抗體及HRP標記的親和素形成復合物，TMB顯色后測定OD值，濃度與吸光度成正比。
二、試劑盒組成
預包被96孔板
凍干標準品(需用1ml蒸餾水復溶)
生物素標記抗體(100×濃縮)
HRP標記親和素(100×濃縮)
洗滌緩沖液(25×濃縮)
TMB顯色液及終止液
三、樣本處理
血清/血漿?：采集后1000×g離心10分鐘，避免溶血或脂血
組織勻漿?：用生理鹽水勻漿后離心取上清
保存?：短期存于2-8℃(48小時內)，長期需分裝凍存于-70℃，避免反復凍融
四、實驗步驟
標準品稀釋?：按說明書梯度稀釋(示例：4000→2000→1000 pg/mL等比稀釋)
加樣?：每孔加入100μL標準品或樣本，37℃孵育120分鐘
洗滌?：用1×洗滌液洗板4-6次，拍干
加檢測抗體?：加入生物素化抗體工作液，37℃孵育60分鐘
加酶結合物?：加入HRP標記親和素，37℃孵育30分鐘
顯色?：加入TMB避光顯色15分鐘，終止后450nm讀數
五、注意事項
不同批次試劑不可混用，使用前所有組分需平衡至室溫
顯色時間需嚴格控制，終止后10分鐘內完成讀數
避免底物接觸金屬器械，操作時需佩戴防護裝備
若樣本濃度超出范圍，需用稀釋液適當稀釋后重測
六、數據計算
以標準品濃度為橫坐標，OD值為縱坐標繪制標準曲線，通過擬合方程計算樣本濃度。
注：以上資料僅供參考，如需更詳細參數(如檢測范圍、靈敏度等)，建議查閱試劑盒配套說明書或聯系供應商獲取。
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