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以下是為您整理的犬白介素18(IL-18)ELISA試劑盒實驗使用說明書,內容涵蓋實驗原理、操作流程及注意事項。
犬白介素18(IL-18)ELISA試劑盒采用雙抗體夾心法原理進行檢測。其核心機制是通過特異性抗體與目標抗原的結合反應實現定量分析。具體過程包括:首先將抗犬IL-18的捕獲抗體包被于微孔板表面形成固相載體;隨后加入待測樣本,樣本中的IL-18會與固相抗體特異性結合;再加入酶標記的檢測抗體,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物;最后通過底物顯色反應(如TMB),在HRP酶催化下產生顏色變化,其顯色強度與樣本中IL-18濃度呈正相關。該技術具有高靈敏度(可檢測pg/mL級別蛋白)和強特異性(雙抗體設計有效排除交叉反應)的特點,適用于血清、血漿、組織勻漿等多種樣本中IL-18的精準定量。
BS-4413 犬白介素18(IL-18)ELISA試劑盒
實驗操作流程?
樣本準備?
血清/血漿?:使用無熱原試管采集,EDTA或肝素抗凝,3000 rpm離心10分鐘取上清。
組織勻漿?:按重量加入PBS(pH 7.4)勻漿,3000 rpm離心10分鐘取上清。
保存條件?:短期(48小時內)2-8℃保存,長期需-20℃分裝,避免反復凍融。
試劑配制?
洗滌液?:濃縮洗滌液按1:20比例用蒸餾水稀釋。
標準品?:用標準品稀釋液梯度稀釋(如125-8000 pg/mL范圍)。
檢測步驟?
加樣?:每孔加入50μL標準品或樣本,37℃孵育30分鐘。
洗滌?:棄去液體,用洗滌液洗板5次,拍干。
酶標抗體?:每孔加入50μL酶標檢測抗體,37℃孵育30分鐘。
顯色?:加入TMB底物液50μL,避光孵育15分鐘。
終止?:每孔加入50μL終止液,立即測定OD值(450nm)。
結果計算?
通過標準曲線擬合,根據樣本OD值計算IL-18濃度。
注意事項?
儀器要求?:需配備450nm酶標儀及精準加樣器(0.5-1000μL)。
操作規范?:避免氣泡干擾,孵育時用封板膜密封微孔。
質控建議?:每批次實驗需設置空白孔和重復孔以確保數據可靠性。
以上內容詳細說明了犬IL-18 ELISA試劑盒的操作規范,如需進一步優化實驗方案或補充其他物種的檢測方法,可提供具體需求。
注意:以上僅供參考,實驗需嚴格遵循試劑盒說明書,避免交叉污染,并確保樣本處理(如離心、稀釋)符合要求?。
植物B-香樹合酶(B-AS) ELISA試劑盒實驗原理 本生一直視質量控制為企業的生命,追求企業競爭力的不斷提升。公司在經營中始終秉承:遵紀守法,嚴于律己,寬仁以待,敢于承擔的企業精神作為標準,以過硬的質量和優良的服務來維護和拓展市場,較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,共創美好的未來。